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姬姆薩染色液(Giemsa stain,1:9)

點擊次數:1366 日期:2018/8/22 15:44:52

姬姆薩染色液(Giemsa stain,1:9)
產品簡介:
    姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ不伊紅混合而成。Giemsa染色原理和結果不瑞氏染色基本相同,姬姆薩染色液對胞漿著色力較強,能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度,特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒,著色清晰,但是對胞核著色偏深,核結構顯色不佳,故姬姆薩染液常不瑞氏染液聯合使用。Giemsa Stain以進口的姬姆薩色素、甲醇為主要原料,含特有襯染劑,經研磨配制而成,能呈現出清晰的細胞染色效果,經常用于組織切片、血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質,不酸性染料伊紅結合,染粉紅色,稱為嗜酸性物質;細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性,不堿性染料美藍或天青結合,染紫藍色,稱為嗜堿性物質;中性顆粒呈等電狀態不伊紅和美藍均可結合,染淡紫色,稱為中性物質。
      Giemsa Stain(1:9)由10×儲存液和磷酸鹽緩沖液組成,1:9混合成工作液后使用;亦可以分開使用,即先用Giemsa Stain染色,再經磷酸鹽緩沖液處理,亦可以得到滿意的染色效果。
產品組成:
產品
100ml
500ml
Storage
試劑(A): Giemsa Stain儲存液(10×)
10ml
50ml
RT避光
試劑(B): 磷酸鹽緩沖液
100ml
500ml
RT
使用說明書
          1份                   
自備材料:
1、載玻片、顯微鏡
2、蒸餾水
3、甲醇
4、0.1~0.5%乙酸
操作步驟(僅供參考):
(一)一步法涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制:
按試劑(A):試劑(B)=1:9 混合,即取1份Giemsa Stain儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為Giemsa工作液,為即用型試劑,不易保存,即用即配。
2、常規方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。
3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加Giemsa工作液覆蓋涂片,室溫滴染15~30min。
4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。
5、干燥、鏡檢。
染色結果:
嗜酸性顆粒
粉紅色
嗜堿性顆粒
紫藍色
中性顆粒
淡紫色
(二)兩步法涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制:
按試劑(A):蒸餾水=1:4 混合,即取1份的Giemsa Stain儲存液(10×)加入到4份的蒸
餾水中充分混勻,即為Giemsa工作液。Giemsa工作液為即用型試劑,易保存,即
用即配。
2、常規方法制備血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1~3min。
3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加適量Giemsa工作液覆蓋涂片,室溫滴染
10~15min。
4、加入等量磷酸鹽緩沖液,輕輕晃動載玻片,室溫靜置5~10min。
5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。
6、干燥、鏡檢。
染色結果:
嗜酸性顆粒
粉紅色
嗜堿性顆粒
紫藍色
中性顆粒
淡紫色
(三)組織切片染色
1、Giemsa  工作液的配制:
按試劑(A):試劑(B)  =1:9 混合,即取1份Giemsa Stain儲存液(10×)加入到9份磷酸鹽緩沖液中充分混勻,即為Giemsa工作液。Giemsa工作液為即用型試劑,不易保存,
即用即配。
2、新鮮組織立即置于Regaud 固定液固定2天,期間應更換1次固定液。
3、3%重鉻酸鉀固定1天。
4、流水沖洗16個小時或過夜。
5、照常規脫水、包埋。
6、切片厚度約為5μm,常規脫蠟至水。
7、蒸餾水清洗2次,每次1min。
8、入含Giemsa工作液染缸,浸染18~24h。
9、蒸餾水稍微清洗。
10、0.1~0.5%乙酸洗1~2min。
11、自來水稍微沖洗。
12、用無水乙醇迅速脫水 3 次,每次5~10s。
13、二甲苯透明,中性樹脂封固。
染色結果:
嗜酸性顆粒
粉紅色
嗜堿性顆粒
紫藍色
中性顆粒
淡紫色
 
 
注意事項:
1、血液涂片或骨髓涂片應厚薄均勻,以免影響染色效果。
2、涂片染色中Giemsa染色后,請勿先去除染液或直接對涂片用力沖洗。
3、如果染色過深或過淺,應調整染色時間或工作液濃度。
4、涂片染色和組織切片染色中,pH值對染色有一定影響,載玻片應清潔、無酸堿污染,以免影響染色效果。
5、染色液經稀釋后液面應金屬光澤則表示染液有染色作用,否則染色液可能失效。
6、組織切片染色中,染色后需用大量0.1~0.5%乙酸急速沖洗,避免浮面沉淀物污染切片后難以洗脫。
7、0.5%乙酸分化常用于Giemsa組織切片染色,如有必要亦可用于細胞涂片,但其濃度應適量下調。0.5%乙酸分化切片時,切片呈粉紅色即可終止。
8、Giemsa組織切片染色中,無水乙醇脫水要迅速,否則切片易褪色。
9、涂片染色和組織切片染色中,如需急速獲得結果,可按Giemsa Stain儲存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:1配制Giemsa工作液,充分混勻,即為快速Giemsa染色工作液,將染色液滴加于細胞涂片或組織切片上,加熱染色,20~30s后重新加染色液,反復5~10次,其余步驟同上。
10、染色液可重復使用,但不能多次重復,若有沉淀物應過濾后使用。
11、Regaud 固定液: 按3%重鉻酸鉀:甲醛=4:1 配制,臨用前混勻,1~2天后失效。
有效期:24個月有效。

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