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葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)

點擊次數:1336 日期:2018/7/9 16:03:12

葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)
產品簡介:
    葉綠體(Chloroplast)是光合作用的細胞器,在光合作用研究中,常需要用提取的葉綠體展開下游研究工作。葉綠體中所含的色素主要有兩大類,葉綠素(包括葉綠素 a 和葉綠素b)和類胡蘿卜素(包括胡蘿卜素和葉黃素),它們與類囊體膜上的蛋白質結合,成為色素蛋白復合體,其中葉綠素又稱葉綠體色素(Chlorophyll)。
葉綠素(Chlorophyll)檢測試劑盒(比色法)檢測原理是葉綠素不溶解于水,而溶于有機溶劑,以有機溶劑粗提葉綠素,根據朗伯-比爾定律,某有色溶液的吸光度(A)與其中溶質濃度(C)和液層厚度(L)成正比,即A=αCL,其中α為比例常數,當溶液濃度以百分比濃度為單位,層液厚度為1cm 時,α為該物質的吸光系數。在本試劑盒情況下,葉綠素a和葉綠素b在 665nm、649nm處有最大吸收波,根據經驗公式可計算出葉綠素 a、葉綠素b及總葉綠素含量。該試劑盒主要用于植物組織中葉綠素的提取以及定量檢測葉綠素a、葉綠素b及總葉綠素含量。該試劑僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產品組成:
   產品組成
   規格
Storage
試劑(A): Chlorophyll Assay buffer
   500ml
RT
試劑(B): 提取粉劑
3g
RT
使用說明書
          1份
自備材料:
1、研缽或勻漿器
2、離心管
3、濾紙或紗布
4、比色杯
5、分光光度計
操作步驟(僅供參考):
1、葉綠素提取:
①取菠菜或其他植物新鮮葉片,洗凈,擦干,去中脈,稱取剪碎的新鮮樣品 0.1g,置于研缽或勻漿器,加入少量提取粉劑(約 50mg)和 1mlChlorophyll Assay buffer,研磨或勻漿成液態。
②將研磨液或勻漿液轉移至 10ml 離心管,用少量葉綠素提取液沖洗研缽或勻漿器數次,最后連殘渣一同倒入 10ml 離心管,補加 Chlorophyll Assay buffer 至 10ml,混勻,避光放置 5min-2h。
③觀察底部組織殘渣接近于白色,即為提取完全,如果仍有較多組織顏色,應再加入Chlorophyll Assay buffer 繼續避光放置。
④濾紙或三層紗布過濾,留取濾液,即為葉綠素粗提液。
2、分光光度計測定:取葉綠素粗提液加入光徑為 1cm 的比色杯,以 Chlorophyll Assay buffer 調零,測定粗提液在 665nm、649nm 處吸光度(A665、A649)。
計算:
葉綠素 a 含量(mg/g)=Ca×V×N/(W×1000)
葉綠素 b 含量(mg/g)=Cb×V×N/(W×1000)
總葉綠素含量(mg/g)=CT×V×N/(W×1000)
式中:Ca=13.95×A665-6.88×A649
Cb=24.95×A649-7.32×A665
CT=6.63×A665-18.07×A649
V=葉綠素粗提液體積(ml)=10(ml)
N=稀釋倍數
W=樣品鮮重或干重(g)
注意事項:
1、 為了避免葉綠素見光分解,操作時應盡量避光,研磨或勻漿時應盡量縮短時間。
2、 測定吸光度值大于 1 時,可適當稀釋后再行測定。
3、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12個月有效。

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