ELISA試劑盒檢測抗生素
氨基糖類、四環素類、喹諾酮類、硝基呋喃類等。目前國內外可以用ELISA方法檢測的抗生素有：氯霉素、鏈霉素、四環素、呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因、恩諾沙星、泰樂菌素、磺胺喹惡啉、磺胺二甲基嘧啶、鹽霉素、磺胺類、阿維霉素、ELISA試劑盒檢測成本低靈敏度高檢測限通常可以達到限量要求，是一種理想的初篩方法。但由于ELISA方法存在一定的假陽性率，因此用美聯免疫吸附法測定的陽性樣品必須做進一步的確定實驗。
以氯霉素為例：、
氯霉素是由委內瑞拉鏈霉素菌產生的一種廣譜抗生素，也是第一種用化學合成法生產的抗生素。氯霉素能抑制細菌蛋白質的合成，對革蘭氏隱形菌作用較強，敏感菌有大腸桿沙門氏菌，傷寒桿菌，副傷寒桿菌、痢疾桿菌、產氣桿菌、肺炎桿菌、鏈球菌、葡萄球菌、白喉桿菌、炭疽桿菌、對各種立克次氏體，原蟲及部分病毒有頂頂的抑制作用。氯霉素自1948年上市以來一直是治療傷副傷寒和沙門氏菌 的首選藥物。氯霉素內服吸收良好。但注射吸收較慢，主要停滯在局部。吸收后全身分布，并聽透過血腦和胎盤屏障。大部分氯霉素在肝中與葡萄糖醛酸結合而失活，少部分降解為芳胺。約10%圓形氯霉素經腎臟排泄，異能通過乳汁分泌。肝或腎功能障礙使消除延長，易發生蓄積中毒。
氯霉素為白色的針狀或長片狀結晶，味極苦，性能極穩定，熔點150.5℃-151.5℃，水中微溶（0.25%），易溶于甲丙醇、乙酸乙酯等有機溶劑中，水溶劑呈中性反應，在PH10以上可失去活性。干燥晶體可以存放兩年以上，在酸堿中加熱的條件下能發生水解。氯霉素耐熱，水溶液煮沸5H也不失效，由于其結構中有發色基團存在，在275-280nm處有較大吸收峰，故可以直接用紫外檢測器檢測。
氯霉素作為應用廣泛的抗生素，曾對畜禽疾病控制和治療起到了重要作用，但由于氯霉素存在聯眾的副作用，能引起人的再生障礙性貧血，粒細胞缺乏癥等疾病，動物食品中氯霉素殘留對人類的健康構成了巨大的威脅，氯霉素的殘留問題引起了國際組織和世界上許多國家和地區的高度重視，歐盟、美國等均在法律規定氯霉素殘留限量標準為零容許量，即不得檢出，我國農業部2002年12月發布的《動物性食品中獸藥最高殘留限量》中規定氯霉素的容量為不得檢出。
現現在已ELISA試劑盒檢測為例介紹；本試劑盒適用于牛奶、肉類、魚、蝦、血清、及蜂蜜中的氯霉素殘留量的測定。
（一）測定原理
測定的基礎是抗原抗體放映。微孔板包被有針對兔IgG（氯霉素抗體）的羊抗體。加入氯霉素抗體、氯霉素標記物、標準或樣品溶液、游離氯霉素與氯霉素酶標記物競爭氯霉素抗體，同時氯霉素抗體與羊抗體連接。沒有連接的酶標記物在洗滌步驟中被去除。將酶基質（過氧化尿素）和發色劑（四甲基聯苯胺）加入到空中并且孵育。結合的酶標記物將無色的發色劑轉化為藍色的產物。加入反應停止液后使眼色由藍色轉變為黃色。在450nm處測量，吸收光強度與樣品中的氯霉素濃度成正比
（二）試劑盒指標
特異性
通過對形影的物質進行交叉反應性分析得到
氯霉素 100% 氯霉素堿 0.5% 甲砜霉素 ＜0.05%
余四環霉素 慶大霉素 變暗霉素 無交叉反應
回收率
牛奶＞80% 魚蝦肉＞80%
蜂蜜＞80% 蛋類＞80%
（三）提供的試劑
1、96孔（12條*8孔）包被有氯霉素羊抗體。
2、濃縮標準液；為氯霉素標準溶液。
3、過氧化物酶標記的氯霉素濃縮液：0.7mL
4、氯霉素抗體濃縮液0.7ml
5、基質（7ml)含有氧化尿素
6、四甲基聯苯胺（TMB)30%過氧化氫，牛血清白蛋白，圖文20等
7、反應停止液1mol/L硫酸
8、緩沖液1:100ml用于標準 酶標記物 抗體 樣品稀釋
9、緩沖液2：1ml,用于測定牛奶樣品時的標準稀釋用緩沖液
（四）試劑
1乙酸乙酯
2、異辛烷/三氯甲烷（氯仿）：（2:3）
3、Carrez I :0.36mol/L 亞鐵qinghua鉀（II）`3H2O
4、Carrez I I:1.04mol/L硫酸鋅·7H2O
5、PBS緩沖液：0.55gNaH2PO4·H2O+2.85gNaH2PO4·2H2O+9gNaCl加入蒸餾水至1000ml：ph702
(五）
奶樣：
1、取5ml樣品支玻璃離心管。
2、4-12℃3500g離心15min如果沒有冰凍離心機可預先將樣品冷卻到8℃
3、轉移上層液至新離心管中。
4、取50微升進行測定
稀釋倍數 1
檢測下限50ng/kg
定量檢測限150ng/kg
牛奶
1、取5ml樣品支玻璃離心管。
2、15℃、3000r/min離心10min
3、3ml上清液與3ml蒸餾水混合，加入250ulCarrez I及250ulCarrez II和4.5ml乙酸乙酯混合10min
4、15℃、3000r/min離心10min
5、將乙酸乙酯層轉移至另一瓶中干燥
6、用1.5ml緩沖液I溶解干燥的殘留物，加入1.5ml正乙烷混合。
7、完全除去正乙烷相
8、取出50微升水相驚醒分析
以百分吸光度值為縱坐標，對應氯霉素濃度（ng/kg)的對半數值為橫坐標建立標準曲線，教正曲線在50ng/kg-1350ng/kg范圍內為線性，相對應每一個樣品的濃度（ng/kg）可以從教正曲線上讀出，為了獲得樣品中的氯霉素實際濃度（ng/kg）,從教正曲線上讀出的濃度值必須誠意相對應的析濕系數。
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