產品名稱：
通用名稱：新型冠狀病毒（2019-nCoV）人 IgG 檢測（ELISA）試劑盒
英文名稱：Diagnostic kit for human IgG detection of 2019-nCoV (ELISA)
試劑盒簡介：
本試劑盒以純化的新型冠狀病毒（2019-nCoV）重組蛋白包被酶標反應板，以 HRP 標記的小鼠抗人 IgG1
單抗為診斷二抗，構建間接法檢測體系，通過對病人康復期血清中病毒特異性 IgG 的定性檢測，用于現癥
病人和既往感染的輔助診斷，亦可通過對病人血清進行稀釋測定抗體滴度。
試劑盒用途：
1. 新型冠狀病毒（2019-nCoV）病人的血清學輔助診斷。
2. 新型冠狀病毒（2019-nCoV）流行病學調查。
所需主要儀器：帶 450nm 波長酶標檢測儀、洗板機。
操作步驟：
1. 根據樣品數量取出一定量的預包被酶標板并平衡至室溫，每次實驗設陰、陽和空白復孔對照；
2. 首先向板中加入 100μl/管樣品稀釋液，然后向其中加入 1μl 的待測血清，向陰性對照孔加入 1μl 陰性血
清；
3. 空白對照加樣品稀釋液 100μl，陽性對照孔加入陽性血清 100μl；
4. 將酶標板用封板膜封閉，置 37℃孵箱中孵育 30 分鐘；
5. 將 20X 濃縮洗滌液用純凈水稀釋 20 倍（V:V=1:19）為洗滌應用液，注意 4℃儲存易出現結晶，取出待
溶解后再配制成應用液；
6. 取出酶標板置于洗板機上用洗滌應用液洗滌（或者用洗瓶手工洗滌）5 次后，甩干孔內殘留液或倒扣酶
標反應板在吸水紙上拍去孔內殘留液；
7. 于各孔中加入 HRP 標記的抗人 IgG1 單抗工作液 100μl/孔，置 37℃孵箱中孵育 30 分鐘；
8. 重復方法 7；
9. 將顯色液 A、B 液按 1:1 混合后取混合顯色液每孔加 100μl，輕拍酶標反應板，混勻后置室溫 5 分鐘（要
求計時準確！最好避光）；
10. 于各孔中加入終止液 50μl/孔，輕拍混勻；
11. 將酶標板置于酶標儀 450nm 波長下，測定各孔光吸收 OD 值。
結果判定：
1. 臨界值（Cutoff）計算：陰性對照復孔 OD 平均值應≦0.1。Cutoff﹦0.748×陰性對照復孔 OD 平均值+0.146，
若陰性對照 OD 值平均值為 0，則陰性對照按照 0.05 計算 Cutoff 值。
2. 結果判斷：待檢標本 OD 值＞Cutoff 為陽性，待檢標本 OD 值＜Cutoff 為陰性。
當標本 OD 值介于陰性灰區下沿（其值可按照該公式計算：0.893×陰性對照復孔 OD 平均值+0.113）與 Cutoff
之間時，該標本為陰性可疑；反之當標本 OD 值介于 Cutoff 與陽性灰區上沿（其值可按照該公式計算：0.401
×陰性對照復孔 OD 平均值+0.248）之間時，該標本為陽性可疑。
注意事項：
1. 診斷試劑盒 4℃冷藏保存，不得長期置于室溫環境中。試劑盒打開包裝后，應盡快使用，若分多次使用，
剩余試劑應置于 2~8℃下保存；
2. 注意加樣量的準確性，減少操作引起的結果誤差；
3. 嚴格掌握每次實驗的時間、溫度的一致性；
4. 為防止邊緣效應的發生，整板檢測時最好把與板框直接接觸的反應孔空置；樣本數量較少時，反應板條
左右兩側分別放置一條廢棄的板條；
5. 洗板機設置的高度不得大于孔深度，以免造成假陽性；
6. 臨床高度疑似新型冠狀病毒（2019-nCoV），而本試劑盒對血清樣品的檢測結果為陰性，建議 7 天后對
患者再次采血檢測，若仍然為陰性，即可判為無感染；
7. 檢測結果應結合病人臨床癥狀和流行病學史做出綜合判斷，應注意由于感染 OC43 型和 HKU1 等冠狀病
毒而造成的假陽性果；
8.使用前請閱讀說明書，嚴格按照說明書操作，不同批號試劑盒中各組分不得混用。
本品僅供科研。
保存條件：2~8℃下保存
有 效 期：6 個月
技術支持:阿儀網
